Molekulārā diagnoze, kas tas ir, kam tas paredzēts un kā tas tiek veikts
Molekulārā diagnoze atbilst molekulāro paņēmienu kopumam, kura mērķis ir noteikt izmaiņas DNS, kas varētu liecināt par, piemēram, ģenētiskām slimībām vai vēzi. Turklāt molekulārie paņēmieni tiek plaši izmantoti infekcijas slimību identificēšanai un apstiprināšanai, jo tie ir ātrāka un precīzāka diagnostikas metode..
Molekulārā diagnoze ir dārga, un tāpēc ārsti to neprasa ļoti bieži, tomēr tā sniedz precīzus rezultātus attiecībā uz izmaiņu klātbūtni, veidu, kā tās var traucēt organisma darbību un pacienta reakciju uz ārstēšana.
Kam tas domāts
Molekulāro diagnostiku var veikt ar vairākiem mērķiem, no kuriem galvenie ir:
- Ar mutāciju saistīto mutāciju identificēšana leikēmija, piemēram, BCR-ABL translokācijas identificēšana, kas raksturīga hroniskai mieloleikozei (HML);
- Raksturīgās mutācijas hematoloģiskas slimības, piemēram, iedzimta hemochromatosis, polycythemia vera, būtiska trombocitēmija un trombofilija, piemēram.
- Molekulāras izmaiņas, kas norāda uz vēzis, piemēram, kolorektālā, plaušu, krūts un smadzeņu vēzis;
- Diagnostika infekcijas slimības, piemēram, hepatīts, uretrīts, toksoplazmoze, leišmanioze utt., papildus HPV vīruss.
Molekulārā diagnoze, neskatoties uz to, ka salīdzinājumā ar citām diagnostikas metodēm tiek uzskatīta par dārgu, ir precīzāka, jo tā spēj informēt par izmaiņām, kas saistītas ar noteiktu slimību, un par šo izmaiņu ietekmes pakāpi organismā, tādējādi palīdzot personas ārstēšanai..
Papildus molekulārajām metodēm, ko izmanto vairāku slimību diagnosticēšanai, tiek izmantotas arī reakcijas uz ārstēšanu novērtēšanai, īpaši cilvēkiem ar vēzi, kas ir viena no efektīvākajām metodēm, lai norādītu uz slimības progresēšanu un recidīvu.
Kā tas tiek darīts
Molekulāro diagnozi var veikt ar jebkuru paraugu, pēc ārsta pieprasījuma, kurš vislabāk var sniegt informāciju par pacienta stāvokli, kas var būt urīns, siekalu vai vairumā gadījumu asinis. Badošanās vai jebkura cita sagatavošanās eksāmenam nav nepieciešama.
Paraugu savāc un nosūta uz laboratoriju kopā ar ārsta norādījumiem, kas informē par eksāmenu vai veicamo pētījumu veidu. Veiktā molekulārā tehnika ir atkarīga no pieprasītā eksāmena, un tā ietver precīzu procedūru sēriju, kuru mērķis ir noteikt ārsta pieprasīto izmaiņu esamību vai neesamību..
Parasti tiek izmantots tikai neliels nosūtīto paraugu daudzums, pārējais tiek glabāts tā, lai vajadzības gadījumā eksāmens tiktu atkārtots.
Skatiet, kādi ir galvenie molekulārie paņēmieni
PCR
A PCR, saīsinājums no polimerāzes ķēdes reakcijas vai Polimerāzes ķēdes reakcija, ir molekulārs paņēmiens, kas sastāv no ģenētiskā materiāla fragmenta - DNS vai RNS - amplifikācijas, lai identificētu mutācijas un tādējādi palīdzētu diagnosticēt slimības.
Šis paņēmiens ir iegūts no ģenētiskā materiāla ekstrakcijas un attīrīšanas, kuru pēc tam ievieto maisījumā, kurā viens no komponentiem ir restrikcijas enzīms, kurš mainās atkarībā no pieprasītās pārbaudes un kura funkcija ir sagriezt materiālu fragmentos. lai varētu identificēt iespējamās ģenētiskās izmaiņas. Maisījumu ievieto termociklerā, kas ir ierīce, kas darbojas ar temperatūras svārstībām, kuras saskaņā ar eksāmenu norādījis profesionālis, un tādējādi ļauj pastiprināt ģenētisko fragmentu. Parastās PCR gadījumā pēc amplifikācijas PCR produkts tiek pakļauts elektroforēze, kas ir molekulāra tehnika, kuras pamatā ir fragmentu svars un lielums, tas ir, saskaņā ar šīm īpašībām tiek ģenerēts joslu modelis, kura analīze tiek veikta, pamatojoties uz pozitīvās kontroles joslu, tas ir, joslu, kas ir zināma kas atbilst ģenētiskām izmaiņām.
A Reālā laika PCR, ko sauc arī par qPCR, tas ir kvantitatīvas PCR tips, tas ir, papildus ģenētisko izmaiņu identificēšanai, tas var sniegt informāciju arī par gēnu ekspresiju, tas ir, par to, cik daudz mainītais gēns tiek izteikts organismā, tādējādi spējot būt ko izmanto diagnozes noteikšanai un ārstēšanas uzraudzībai. Reālā laika PCR nav nepieciešama elektroforēze, visu ģenētiskā materiāla pastiprināšanas un analīzes procesu veic ierīce, un rezultātu interpretē apmācīts veselības speciālists.
Secība
secība ir molekulārā tehnika, kas sastāv no DNS nukleotīdu secības noteikšanas, kas veido ģenētiskā materiāla vienības. Sekvenēšana notiek no reakcijas, kas līdzīga PCR, tomēr amplifikācijas maisījumā modificētus nukleotīdus pievieno, pievienojot fluorhromus, kuri kā materiāls tiek pastiprināts, modificētie nukleotīdi tiek iestrādāti DNS un rada vairākus fragmentus, kas atbilst sekvencēšanas produktam.
Reakcijas produktu ievieto ierīcē, ko sauc par DNS sekvenceru, kurā, kad fragmenti tiek sasniegti ar iekārtas lāzeru, fluorhromi tiek ierosināti, izstarojot fluorescenci, ko iekārta norāda ar pīķiem, ar katru pīķi atbilstošu. uz nukleotīdu. Reakcijas beigās aprīkojums informēs DNS secību, tādējādi palīdzot ārstam diagnosticēt ģenētiskās slimības..
