Elektroforēze kas tas ir, kam tas paredzēts un kā tas tiek darīts
Elektroforēze ir laboratorijas paņēmiens, kura mērķis ir atdalīt molekulas pēc to lieluma un elektriskā lādiņa, lai varētu diagnosticēt slimības, pārliecināties par olbaltumvielu ekspresiju vai identificēt mikroorganismus..
Elektroforēze ir vienkārša un lēta procedūra, ko izmanto laboratorijas darbā un pētniecības projektos. Atbilstoši elektroforēzes mērķim var būt nepieciešams veikt citus testus un eksāmenus, lai sasniegtu diagnozi, piemēram.
Kam tas domāts
Elektroforēzi var veikt dažādiem mērķiem, gan pētniecības projektos, gan diagnosticējot, jo tā ir vienkārša un lēta tehnika. Tādējādi elektroforēzi var veikt, lai:
- Identificējiet vīrusus, sēnītes, baktērijas un parazītus, šo lietojumu biežāk izmantojot pētniecības projektos;
- Paternitātes pārbaude;
- Pārbaudiet olbaltumvielu ekspresiju;
- Nosakiet mutācijas, kas ir noderīgas, piemēram, leikēmijas diagnosticēšanā;
- Analizēt cirkulējošā hemoglobīna veidus, kas noder sirpjveida šūnu anēmijas diagnosticēšanā;
- Novērtējiet olbaltumvielu daudzumu asinīs.
Atbilstoši elektroforēzes mērķim ārstam var būt nepieciešams veikt citas papildu pārbaudes, lai pabeigtu diagnozi.
Kā tas tiek darīts
Elektroforēzes veikšanai nepieciešams gēls, kas atkarībā no objektīva var būt no poliakrilamīda vai agarozes, elektroforēzes buferis un tvertne, molekulmasas marķieris un fluorescējoša krāsa, papildus UV vai LED gaismas iekārtai, kas pazīstama arī kā transilluminator.
Pēc želejas sagatavošanas ir jānovieto noteikts priekšmets, lai iedobes tiktu izgatavotas želejā, tautā sauktu par ķemmi, un ļautu želejai iestatīties. Kad želeja ir gatava, vielas vienkārši uzklājiet uz iedobēm. Šim nolūkam vienā no iedobēm jāievieto molekulmasas marķieris, pozitīvā kontrole, kas ir viela, par kuru ir zināms, kas tā ir, negatīvā kontrole, kas garantē reakcijas derīgumu, un analizējamie paraugi. Visi paraugi jāsajauc ar fluorescējošu krāsu, jo tādā veidā ir iespējams vizualizēt joslas uz transiluminatora..
Gēls ar paraugiem jāievieto elektroforēzes tvertnē, kurā ir konkrētais buferšķīdums, un pēc tam ierīci ieslēdz tā, lai būtu elektriskā strāva un attiecīgi arī potenciāla starpība, kas ir svarīgi atdalīšanai daļiņas pēc to slodzes un lieluma. Elektroforētiskās darbības laiks mainās atkarībā no procedūras mērķa un var ilgt līdz 1 stundai.
Pēc noteiktā laika ir iespējams apskatīt elektroforēzes rezultātu caur transilluminatoru. Kad želeju novieto UV vai LED gaismā, ir iespējams vizualizēt joslas modeli: jo lielāka ir molekula, jo mazāka ir tās migrācija, tuvojoties urbumam, savukārt, jo gaišāka ir molekula, jo lielāks ir migrācijas potenciāls.
Lai reakcija būtu validēta, ir jāattēlo pozitīvās kontroles joslas un negatīvajā kontrolē nekas nedrīkst tikt vizualizēts, pretējā gadījumā tā ir norāde, ka ir noticis piesārņojums, un viss process ir jāatkārto.
Elektroforēzes veidi
Elektroforēzi var veikt dažādiem mērķiem, un atbilstoši tā mērķim var izmantot vairākus gela veidus, no kuriem visizplatītākais ir poliakrilamīds un agaroze.
Elektroforēze mikroorganismu identificēšanai biežāk jāveic pētījumu laboratorijās, tomēr diagnostikas nolūkos elektroforēzi var izmantot, lai identificētu hematoloģiskas slimības un slimības, kas attīstās līdz ar olbaltumvielu daudzuma palielināšanos, kas ir galvenie elektroforēzes veidi. :
1. Hemoglobīna elektroforēze
Hemoglobīna elektroforēze ir laboratorijas paņēmiens, kas tiek veikts, lai identificētu dažādus hemoglobīna veidus, kas cirkulē asinīs, ļaujot noteikt ar hemoglobīna sintēzi saistītu slimību klātbūtni. Hemoglobīna veidu identificē ar elektroforēzes palīdzību pie noteikta pH līmeņa, ideālā gadījumā no 8,0 līdz 9,0, pārbaudot joslu modeli, ko var salīdzināt ar parasto modeli, ļaujot noteikt patoloģisku hemoglobīnu klātbūtni..
Kāpēc tas ir paredzēts: Hemoglobīna elektroforēze tiek veikta, lai izpētītu un diagnosticētu ar hemoglobīna sintēzi saistītas slimības, piemēram, sirpjveida šūnu anēmiju un C hemoglobīna slimību, papildus tam, ka tas ir noderīgs arī talasēmijas diferencēšanā. Uzziniet, kā interpretēt hemoglobīna elektroforēzi.
2. Olbaltumvielu elektroforēze
Olbaltumvielu elektroforēze ir eksāmens, kuru pieprasa ārsts, lai novērtētu olbaltumvielu daudzumu, kas cirkulē asinīs, un tādējādi identificētu slimības. Šo pārbaudi veic no asins parauga, ko centrifugē, lai iegūtu plazmu - asins daļu, kas, starp citām vielām, satur olbaltumvielas.
Pēc elektroforēzes var vizualizēt joslu shēmu un pēc tam grafiku, kurā norādīts katras olbaltumvielu frakcijas daudzums, kas ir diagnozes pamatā.
Kāpēc tas ir paredzēts: Olbaltumvielu elektroforēze ļauj ārstam izpētīt multiplās mielomas, dehidratācijas, cirozes, iekaisuma, aknu slimības, pankreatīta, vilkēdes un hipertensijas rašanos saskaņā ar joslu shēmu un diagrammu, kas parādīta pārbaudes ziņojumā.
Saprast, kā tas tiek darīts un kā izprast olbaltumvielu elektroforēzes rezultātu.
